Клональне мікророзмноження і оздоровлення лаванди in vitro.

Abstract

Дисертаційна робота присвячена розробці технології клонального мікророзмноження і прийомів оздоровлення посадкового матеріалу лаванди вузьколистної. Досліджені морфогенетичні потенції ізольованих апікальних меристем лаванди в культурі in vitro. Показана залежність регенераційних процесів у лаванди від складу і консистенції живильного середовища, генотипу, розміщення меристем на пагоні донорної рослини, строку введення меристем. Оптимізовані умови культивування на етапах власне мікророзмноження, укорінення мікропагонів, адаптації мікророслин до умов in vivo. Підібрані режими та проведене порівняльне вивчення ефективності прийомів оздоровлення культури апікальних меристем, термотерапії in vitro і хемотерапії для звільнення рослин лаванди від вірусу некротичної плямистості бальзаміну (INSV). Вивчені особливості розмноження оздоровлених рослин методом зеленого живцювання з застосуванням стимуляторів росту. Розроблено технологію клонального мікророзмноження та біотехнологічну схему одержання оздоровленого посадкового матеріалу лаванди.

Диссертационная работа посвящена разработке технологии клонального микроразмножения и приемов оздоровления посадочного материала лаванды узколистной. Исследованы морфогенетические потенции изолированных апикальных меристем лаванды в культуре in vitro. Показана зависимость регенерационных процессов у лаванды от состава и консистенции питательной среды, генотипа, положения меристем на побеге донорного растения, срока введения меристем. Изучены особенности развития меристемных культур в течение десяти пассажей. Установлено, что коэффициент размножения сохранялся на стабильном уровне у сорта Синева и образца 337-9 до 8-го пассажа (1:7,77-12,45 и 1:7,60-11,85 соответственно), у сорта Степная до 7-го пассажа (1:6,19-11,81), у образца 310-17 до 6-го пассажа (1:6,14-8,37). Оптимизированы условия культивирования на этапах укоренения микропобегов и адаптации микрорастений к условиям in vivo. Выявлено поражение растений лаванды вирусом некротической пятнистости бальзамина (INSV). Подобраны режимы и проведено сравнительное изучение эффективности приемов оздоровления культуры апикальных меристем, термотерапии in vitro и хемотерапии для освобождения растений лаванды от INSV. Установлена высокая регенерационная способность апикальных меристем размером 0,2 мм – 87,5-100,0 %, что позволяет использовать метод культуры меристем для оздоровления от INSV, эффективность которого достигает 80,0-100,0 %. Определен оптимальный режим термотерапии пораженных растений в условиях in vitro: температура 37±1ºС, экспозиция обработки – 10 суток, фотопериод – 16 часов, лучшим растительным материалом являются укорененные микрорастения второго пассажа. Эффективность оздоровления с использованием данного приема составляла 70,0-100,0 % и зависела от генотипа и концентрации вируса в растении. Показано, что для проведения хемотерапии растений лаванды в качестве вироцида можно использовать виразол в концентрации 20,0 мг/л, что обеспечивает выход безвирусных растений на уровне 80,0 %. Изучены особенности размножения оздоровленных растений лаванды методом зеленого черенкования. Выявлена высокая ризогенная способность (82,81-98,43 %) зеленых черенков, заготовленных из однолетних меристемных растений. При этом показано стимулирующее действие ИМК и ИУК на длину и сырую массу корней. Разработана технология клонального микроразмножения и биотехнологическая схема получения оздоровленного посадочного материала лаванды.

The thesis is dedicated to development of clonal micropropagation technology and techniques of improvement of planting material of Lavandula angustifolia Mill. Morphogenetic potentialities of isolated apical meristems of lavender in culture in vitro are investigated. Dependence of regeneration processes of lavender on composition and consistence of nutrient medium, genotype, meristems position on shoots of donor plant and term of meristems introduction is shown. Cultivation conditions at phases of proper micropropagation, rootage of micropropagules and acclimatization of microplants to conditions in vivo are selected. The comparative study of efficiency of techniques of improvement of apical meristems culture, thermotherapy in vitro and chemotherapy for clearing plants of lavender of the Impatiens necrotic spot virus (INSV) is conducted. Features of breeding of the improved plants by the method of green cutting with application of growth-promoting factors are studied. The biotechnological scheme and technological map of clonal micropropagation, and the biotechnological scheme of getting of the improved sowing material of lavender is developed.